方法:
1.用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段,DNA连接酶,来源于大肠杆菌,可用于连接粘性末端,T4DNA连接酶,来源于T4噬菌体,可用于连接粘性末端和平末端,但连接效率低。
2.用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上polydAdT尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。
3.先在DNA片段末端加上化学合成的衔接物或接头,使之形成粘性末端之后,再用DNA连接酶将它们连接起来。
4.这三种方法虽然互有差异,但共同的一点都是利用DNA连接酶所具有的连接和封闭单链DNA的功能,DNA连接酶最突出的特点即为能够催化外源DNA和载体分子之间发生连接作用,形成重组的DNA分子。
常用的目标分解方法两种,以下介绍常用的目标分解方法:
1.指令式分解。
指令式分解是分解前不与下级商量,由领导者确定分解方案,以指令或指示、计划的形式下达。
该分解方法虽然容易使目标构成一个完整的体系,但由于未与下级协商,对下级承担目标的困难、意见不了解,容易造成某些目标难以落实下去。
更由于下级感到这项目标是上级制定的,因而不利于下级积极性的激励和能力的发挥。
2.协商式分解。
协商式分解使上下级对总体目标的分解和层次目标的落实进行充分的商谈或讨论,取得一致意见。
协商式分解容易使目标落到实处,也有利于下级积极性的调动和能力的发挥。
目标分解是指将总体目标在纵向、横向或时序上分解到各层次、各部门以至具体人,形成目标体系的过程。
目标分解是明确目标责任的前提,是使总体目标得以实现的基础。